加味小柴胡汤干预抑郁症的实验研究

加味小柴胡汤干预抑郁症的实验研究
中文摘要
目的:本实验以经方小柴胡汤加味生龙骨、生牡蛎(简称加味小柴胡汤)来观察对抑郁症大鼠模型的治疗作用,以进一步探讨其作用机理,为临床应用经方防治抑郁症提供实验和理论依据。
方法:将SD大鼠48只随机分为六组:正常组8只,模型组(8只),加味小柴胡汤小剂量组(8只),加味小柴胡汤中剂量组(8只),加味小柴胡汤大剂量组(8只),西药氟西汀组(8只)。后四组通过40C冰水游泳5分钟,夹尾5分钟,断水24小时,断食24小时,昼夜颠倒24小时,足底电击5分钟(1mA 30V)等刺激随机安排在30日内,每日一种,制造抑郁症动物模型。断头取血和大脑额叶,并根据西医发病机制,分别从发病的中枢单胺类神经功能失衡学说、细胞免疫因子学说、血脂代谢谢异常学说三种机制的角度综合观察。筛选出高密度脂蛋白(high density lipoprotein)、甘油三酯(triglycerides)、胆固醇(Cholesterol)、去甲肾上腺素(norepinephrine)、多巴胺(dopamine)、5-羟色胺(serotonin)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor)、白细胞介素1(interleukin 1)、白细胞介素4(interleukin 4)、白细胞介素6(interleukin 6)等灵敏性、特异性均高的指标,进行多重比较研究。
结果:体重变化、脑中多巴胺、5-羟色胺、去甲肾上腺素、血中白细胞介素1、白细胞介素2、白细胞介素6、肿瘤坏死因子、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白等含量表现为:空白组与模型组均有显著差异(P﹤0.05);空白组与氟西汀组无显著差异(P﹤0.05);模型组与氟西汀组有显著差异(P﹤0.05);模型组与加味小柴胡汤中、大剂量组有显著差异(P﹤0.05);加味小柴胡汤小、中、大剂量组与氟西汀组除体重、高密度脂蛋白外,无显著异常(P>0.05)。
结论:加味小柴胡汤尤其是中、大剂量组对于治疗抑郁症的具有良好的效果。
关键词:抑郁症 加味小柴胡汤 细胞因子 神经递质
前言
随着科技发展和经济增长,社会竞争日益激烈,环境、人际关系的变化,社会生活方式的改变,使人们的生活压力增大,导致心理疾病—抑郁症的发病率越来越高,不仅危害人们的身心健康,增加躯体疾病的死亡率,而且使患病者的社会功能下降,严重影响到人们的日常生活与工作,甚至引起自杀,据统计发病患者中自杀率已高达10%。世界卫生组织(WTO)预计,到2020年,抑郁证将成为各类疾病发病率的的榜首。有报道我国抑郁证的患病人数已高达1亿,渐成为中国第二大疾病负担,在综合医院中大约十分之一的门诊病人和三分之一的住院病人都患有不同程度的抑郁障碍,因此抑郁症的预防与治疗就显得极为重要。
西医关于抑郁症的发病机制至今尚未完全阐明,目前仅有脑内单胺类神经功能失衡、血脂代谢谢异常等几种学说推测。而其药物主要包括单胺氧化酶抑制剂、三环类抗抑郁药、杂环类抗抑郁药、选择性5-羟色胺再摄取抑制剂、选择性去甲肾上腺素再摄取抑制剂、5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取双重抑制剂、去甲肾上腺素和特定的5-羟色胺再摄取抑制剂以及少数植物药提取物。这几类药物大多能在短期快速、有效的改善抑郁症患者的症状,但由于其副作用大,药价高和易复发、依从性差等缺陷,长期服用往往造成患者其它方面的不适。
祖国传统医学对抑郁症的认识深刻,其治疗方法手段多,如中药、针灸、心理疗法等,副作用小,经济实惠等优点,深受广大抑郁症患者的欢迎。我们根据祖国传统医学对于“郁证”的学说理论,深入研究张仲景学说,结合近几年治疗抑郁症的临床经验,认为抑郁症的发病也有其时代性,跟社会环境、工作压力、个人心理等因素有关,而邪郁少阳、枢机不利是抑郁症最基本及最重要的发病核心,是情志抑郁而导致多种疾病的一个共同证候,它在抑郁症的各个发展阶段都可能存在,故和解少阳、调达枢机是治疗的基本原则。经方小柴胡汤[1]治疗精神性疾患具有组方严谨,疗效确切,副作用小的优点。并从张仲景众多药对中筛选出生龙骨、生牡蛎两味具有镇惊安神的药物加入小柴胡汤中,以增强治疗抑郁症的疗效。
因此在探求抑郁症中西医发病机理的基础上,通过动物实验的手段来验证加味小柴胡汤治疗抑郁症的作用,以使经方达到广泛的扩大应用。
第一部分抑郁症理论的探讨论述
一、现代医学的理论探讨
一、现代医学对抑郁症的发病机制学说
抑郁症的发病原因和机制十分复杂,目前尚处于假说阶段,现代医学认为,抑郁症的发生与各种应激性生活事件构成的心理、社会因素和遗传等生物因素密切相关。其比较认可的发病机制有:
1、神经递质学说,包括去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5—羟色胺(5HT)、乙酰胆碱含量异常及某些受体功能改变[23]。
(1)、5HT与抑郁症:机体内5HT有99%存在于外周,有1%存在于中枢神经细胞内。与抑郁症相关的是中枢5HT系统含量减少。
(2)、NE与抑郁症:有研究学者认为,NE缺乏可导致抑郁症的发生,尤其是从脑干的蓝斑色素上皮向边缘系统的投射通路中的NE匮乏。这一假说得到了许多实验的证实,如在抑郁症患者的尿与脑脊液中,NE的代谢谢产物明显减少。
(3)、DA与抑郁症:抑郁症患者脑内DA的代谢谢与抑郁症有关。
广大学者认为去甲肾上腺素、多巴胺和5—羟色胺是与抑郁症生理、病理学密切相关的三种主要神经递质,参与情感、睡眠、警觉、记忆、食欲等功能的调节,它们的代谢谢障碍,以及相互之间的联系与影响,使神经递质的水平增高或下降,而使精神活动受到某种抑制,从而发生抑郁症。
2、免疫研究学说,主要集中在免疫细胞和细胞因子研究方面特别是细胞因子研究,较多的是白细胞介素(IL)、肿瘤坏死因子(TNF)等,研究者[45]特别认为炎细胞因子IL1、IL2、IL6等水平增高在抑郁症急性期中起重要作用。
3、内分泌系统方面,包括丘脑下部-垂体-肾上腺轴、下丘脑-垂体-去甲肾上腺素轴、性激素的改变;研究认为HPA轴功能亢进,HPT轴功能低下与抑郁症的发病密切相关。
4、循环系统方面,包括血脂、血压异常[6];
5、生物节律的变化,抑郁症者常伴有睡眠障碍和昼夜交替的心境变化,昼夜节律的同步障碍可能引起抑郁症的发生;
综上所述,抑郁症是一类受遗传因素影响,有一定生物学基础的疾病,它的发生同时还受社会、心理、文化等多因素共同作用,由此而形成生物―心理―社会的统一模式,是多种因素综合作用的结果。
二、抑郁症的诊断标准
诊断标准参照《中国精神障碍分类与诊断标准第三版》(CCMD3)抑郁发作症状标准和汉密尔顿抑郁量表(HAMD)(24项)>21分。
三、抑郁症的药物及治疗疗程
目前临床主要的抗抑郁药物大多依据神经递质的失衡学说,临床的确切疗效亦佐证了此理论的正确性。但是这类抑郁症的治疗药物主要依靠化学合成,合成抗抑郁药[79]大多存在抗抑郁谱窄、毒副作用大、药价高和易复发等缺陷[10]。
(1)、MAOIs:属于第一代抗抑郁药。作用机理是使脑内神经细胞MAO的活性降低,使单胺类神经递质降解减少,从而提高NE、5HT、DA的含量而起到抗抑郁的作用。目前临床应用的主要有苯乙肼、反苯环丙胺、异卡波肼等少数几种。
(2)、TCAs:是第二代抗抑郁药。属于第一代单胺再摄取抑制剂,作用机理是抑制突触前膜对NE、5HT的再摄取,提高突触间隙NE、5HT的含量,从而起到抗抑郁的作用。疗效明显优于MAOIs,代表品种有丙米嗦、氯米帕明、曲米帕明等。
(3)、选择性NE重摄取抑制剂:属于第三代抗抑郁剂。作用机理是抑制突触前膜对NE的再摄取,但不影响5HT的再摄取,代表药物有马普替林、米安色林,适用于内源性抑郁症、心因性抑郁症、更年期抑郁症等。
(4)、选择性5HT重摄取抑制剂:属于第四代抗抑郁剂。可选择性的抑制突触前膜对5HT的重摄取,对NE、DA、HT及胆碱能神经影响较小。具有与TACs类似的作用。代表药物有:菲氟林、氟西汀、帕罗西汀、舍曲林、西酞普兰,适用于各种类型的抑郁症。
(5)、5HT和NE再摄取抑制剂(SNRI)和去甲肾上腺素能和5—羟色胺能抗抑郁剂(NaSSA):属于第五代抗抑郁剂。代表药物有米氮平、米安色林,作用机理是能阻断NE能神经元突触前膜α2受体,阻断负反馈,促进神经元释放NE,还可以阻断5HT神经元突触后膜α2受体,促进5HT的释放。
因抑郁症具有高复发率的特点,用药有其特殊规律,治疗分急性治疗期(68周)、继续治疗期(49月)、维持治疗期(半年),严重者需终身服药。
二、中医理论探讨
一、古代中医对抑郁症的理论及方药实践
传统中医理论中最初没有抑郁症这一专业病名,根据现代对本病的描述来看,抑郁症当归类于古代的郁证、百合病、梅核气、奔豚气、脏躁等病种之内。
中国最早的医学论著《黄帝内经》中就有从不同角度全面阐述关于“郁”的理论记载。
从气血角度,如《素问•调经论篇》“血气不和,百病乃变化而生。”《素问•疏五过论》云:“离绝苑结,忧恐悲怒,五脏空虚,血气离守。”《素问•通评虚实论篇》“隔塞闭绝,上下不通,则暴忧之病也。”从五行运气角度,如《素问•六元正纪大论》“郁极乃发,待时而作”阐述了五常之气对于人的影响。并提出了“木郁达之,火郁发之,土郁夺之,金郁泄之,水郁折之。”的治疗方法。从脏腑角度,如《素问•阴阳应象大论》“人有五脏化五气,以生喜怒悲忧恐。”从而有五脏致郁之说。初步提出了情致致郁的理论。此外尚有心理开导性方式,如《内经•师传篇》云:“告之以其败,语之以其善,导之以其便,开之以其苦。”
汉代张仲景也从脏腑、气血津液等角度分别予以阐述(后面详细论述)。
历代医家[1113]根据《黄帝内经》,在临床实践中不断发展和完善“郁”的理论,并创制出不同的方药及治疗方法。
从脏腑角度阐述的有隋代药王孙思邈在《千金药方》中就有“心气不定,五脏不足,甚者忧愁悲伤不乐,忽忽喜忘,朝暮剧,暮朝发。”的记载,并制出定志小丸、开心散等方药来治疗郁证。同时开创了针灸治疗抑郁的先河,如《备急千金要方》记载有:“天井、神道、心俞主悲愁恍惚,悲伤不乐”。
从气血角度提出论述的有:《医经溯回集•五郁论》云:“凡病之起也多由于郁,郁者,滞而不通之意。”金元时期朱丹溪在《丹溪心法》中提出“气血冲和,百病不生,一有拂郁,诸病生焉,故人身诸病,多生于郁。”并立方越鞠丸来治疗,气、血、湿、热、食、痰郁为病。直到明朝张景岳在《景岳全书》中才明确提出忧郁病(即抑郁症)这一病名。《景岳全书•论情志三郁证治》首次明确了狭义“郁证”的定义,指出“凡五气之郁,则诸病皆有,此因病而郁也;至若情志之郁,则总由乎心,此因郁而病也。
从七情角度阐述的有:宋代陈无择在《三因极一病证方论》中指出“七情,人之常情,动之则先自脏腑郁发,外形于肢体”。从而明确提出了七情致郁的学说理论。明代徐春圃《古今医统大全•郁证门》指出:“郁为七情不舒,遂成郁结,既郁之久,变病多端。”可见郁能致百病,七情也能导致郁证的发生。清•叶天士更在所著《临证指南医案•郁》中记载了众多的情志疾患的医案,认为“七情之郁居多”。李用粹《证治汇补》云:“七情不快,郁久而成病。”也将七情抑遏作为郁证的首要病因。清•沈金鏊认为“忧愁思虑之郁”,“此郁开之极难”,从疏肝解郁论治,方用加味逍遥散主之。《张氏医通》云:“郁证多缘于志虑不伸,而气先受病,故越鞠、四七始立也。”关于七情致病的治疗除针灸和方药外尚有情致的调节治疗,如朱丹溪有谓“五志之火,因七情而生……宜以人事制之……”。吴尚先提出“七情之病,看花解闷,听曲消愁,有胜于服药者也。”
二、汉代张仲景对抑郁症的观点
医圣张仲景撰用《素问》、《九卷》、《八十一难》、《阴阳大论》等书,创造性的提出并应用六经辨证,在《伤寒杂病论》中有很多具有郁证表现的病证,如百合病、梅核气、脏躁等,分别提出治疗法则和方药。
(1)、滋养补益法:《金匮要略•妇人杂病脉证并治第二十二》“妇人脏躁,喜悲伤欲哭,像如神灵所作,数欠身,甘麦大枣汤主之”。本方证为忧思过度,心阴受损,肝气失和所致。据《素问•藏气法时论》“肝苦急,急食甘以缓之”及《灵枢•五味》“心病者,宜食麦”之意。小麦甘凉,养肝补心,除烦安神。大枣甘温,甘缓滋补,柔肝缓急,宁心安神,从而有补益心肝的作用。
(2)、滋阴安神法:《金匮要略•百合狐惑阴阳毒病脉证治第三》“百合病者,百脉一宗,悉致其病也。意欲食复不能食,常默默,欲卧不能卧,欲行不能行,欲饮食或有美时,或有不用闻食臭时,如寒无寒,如热无热,口苦,小便赤,诸药不能治,得药则剧吐利,如有神灵者,身形如和,其脉微数。”处以百合地黄汤、百合知母汤等方剂来治疗心肺阴虚内热引起的精神系列疾病。
(3)、化痰安神法:《金匮要略•妇人杂病脉证并治第二十二》“妇人咽中如有炙脔,半夏厚朴汤主之。”清•张潞认为“妇人咽中如有炙脔”属于“郁”。《丹溪心法》“七情相干,痰涎凝结,如絮如膜,甚如梅核,窒碍于咽喉之间,咯不去,咽不下。”明确提出其病因病机为气结生痰,痰盛则气愈结,痰气交阻喉间。
(4)、清宣郁热法:《伤寒论》第76条“发汗吐下后,虚烦不得眠,若剧者反复颠倒,心中懊憹,栀子豉汤主之。”是治疗热郁胸隔、邪热扰心而致烦躁失眠的条文,以栀子豉汤清宣郁热,除烦安神。
(5)、逐瘀泻热法:《伤寒论》第106条“太阳病不解,热结膀胱,其人如狂,血自下,下者愈。其外不解者,尚未可攻,当先解其外。外解己,但少腹急结者,乃可攻之,宜桃核承气汤。”《伤寒论》第237条“阳明证,其人喜忘者,必有蓄血。所以然者,本有久癖血,故令喜忘。屎虽硬,大便反易,其色必黑者,宜抵当汤下之”。如狂、喜忘都在神经功能方面的障碍,都是情致失常的一种表现,其病机属瘀血与邪热互结而成,当用破血逐瘀来治疗。
(6)、和解少阳法:《伤寒论》第96条“伤寒五六日中风,往来寒热,胸胁苦满,嘿嘿不欲饮食,心烦喜呕。或胸中烦而不呕,或渴,或腹中痛,或胁下痞硬,或心下悸,小便不利,或不渴,身有微热,或咳者,小柴胡汤主之。”邪郁少阳,枢机不利而致情绪低落烦躁用小柴胡汤和解少阳、调达枢机,故后世医家誉之为疏肝第一方。
(7)、潜阳安神法:《伤寒论》第118条“火逆下之,因烧针烦躁者,桂枝甘草龙骨牡蛎汤主之。”原方因伤寒误下后,又因火致逆,以致心阳受伤,心神被扰,烦躁不安。本方潜阳镇逆,收敛神气故能调节治疗抑郁症所致的心烦燥怒等症状。
(8)、镇惊安神法:《伤寒论》“伤寒八九日,下之,胸满,烦,惊,小便不利,谵语,一身尽重,不可转侧者,柴胡加龙骨牡蛎汤主之。”原方治疗外感伤寒而误下,导致阳邪里陷,弥漫少阳,肝胆经气不利,所致的症状,其病机为胆热痰扰,肝气拂郁。胸闷,烦、惊多为抑郁症患者的众多表现,柴胡加龙骨牡蛎汤能镇惊祛痰,清热降逆,疏肝之急以安神定志。
(9)、疏肝解郁法:《伤寒论•辨少阴病脉证并治》:“少阴病,四逆,其人或咳,或悸,或小便不利,或腹中痛,或泄利下重者,四逆散主之。”其证源于外邪传经入里,阳气被遏,气机不得疏泄,以致阳气不能达于四末,而见或胁肋、脘腹疼痛,或四肢不温等症,四逆散透邪解郁,疏肝理脾故亦能治疗抑郁所致的肝气犯脾症状。
三、现代中医学对郁证的理论及症型认识
现代中医学的的不断发展,对于“郁证”的认识越来越深刻,其含义当有广义和狭义之分。即:广义的郁病是因病致郁,即泛指由外感、六淫、内伤七情引起的脏腑机能不和,从而导致气血痰火食湿等病理产物的滞塞和郁结所造成脏腑生理功能紊乱,气血津液运行失调所出现的一类病证。狭义的郁病,是指因郁致病,则主要指情志不舒,气郁不畅,忧思不解,气滞于内,气结不行,气机失调而致气机郁滞,脏腑功能失调引起的心情抑郁、情绪不宁、胸部满闷、胁肋胀痛,或易怒欲哭,或咽中如有异物梗阻等症为主要症状的疾病。并且现代中医家根据历代前贤经验与现代中医的发展结合,总结归纳而将郁证的症型[16]根据脏腑、气血津液、七情等方面辩证[1416]的划分大致以下几种:肝气郁结、肝郁化火、心气亏虚、心脾两虚、肝肾阴虚、瘀血阻滞、痰气郁结等七种类型。其中涉及心、肝、脾、肾等脏,并以肝脏为主。而西医所谓的抑郁症应该归属于中医郁证的范畴,其症状散在的体现于中医辨证论治的各种症型中。
四、对抑郁症的理论认识及选取小柴胡汤做主方的依据
在老师的指导下结合历代医家关于郁证的论述,深入研究张仲景学说,认为抑郁症虽涉及心、肝、脾、肾等脏腑,但其主要的病位在肝胆经。治疗方案虽然繁杂,病机却不外乎肝郁气滞、邪热阴虚、血瘀痰凝等[17]。《内经》有“肝者将军之官,谋虑出焉。”的描叙,说明了肝脏功能与情致精神活动变化密切相关[1819]。中医基础理论对其生理这样描述:肝藏血,主疏泄,性喜条达而恶抑郁。而其病理状态描述较多如《灵枢•本神篇》云“肝气虚则悲,实则笑不休。”《圣济》有论:“原四时之所化,始于肝木也。十二经之养,始于肝也。”《医碥》也提出:“百病皆生于郁……郁而不舒,则皆肝木之病矣。”明代赵献可在《医贯•郁病论》中认为五郁以木郁为先导,故提出“以一法代五法,神而明之,屡获奇效。一法即‘木郁达之’,肝胆气舒则诸郁皆解。……一方治其木郁,而诸郁皆因而愈。一方者何?逍遥散是也……。”名老中医俞慎初认为逍遥散即小柴胡汤的变法,且根据抑郁症的临床症状及发病转归等,认为情志不舒,气机郁滞为主要病因病机。同时我们认为随着时代的发展,疾病发病的原因及种类也有所变化,即疾病的发生具有时代性。现代社会一方面物质文化生活水平提高,另一方面工作压力也不断增大,而肝气郁结的发生可能性(精神抑郁)相较其它症型增多。并结合现在国内主要采用《中国精神障碍分类与诊断标准第3版(《CCMD一3》)的抑郁发作的诊断标准做参考。
人体是一个有机的整体,脏腑之间的生理功能、病理变化均有着密切的联系,心、肺、脾、肾脏腑功能失调也会进一步加剧肝疏泄功能的失调,使精神抑郁加深。本是因郁致病,复又因病致郁,往往相互影响,反复缠绵难愈分析疾病发生的病因及病机演变,情志抑郁不畅使肝失条达,气失疏泄,以致肝气郁结;肝气郁结,木不疏土,脾失运化之职,则饮食减少,生化乏源,营养渐耗,心失所养,神失所藏。气郁则血瘀不行,血瘀日久新血不生,以致阴血不足,出现肝肾阴虚症状。因此肝胆气郁是抑郁症的发病核心,随着病情进展出现以五脏功能失调为表现的不同证型。肝郁气滞贯穿整个抑郁症的发病过程,故抑郁症的治疗大法应为从肝论治[20],治疗的核心在于调理肝胆的疏泄功能,及早疏通气机对于防止病情发展发生为他病具有重要意义。
小柴胡汤出自《伤寒杂病论》第96条“胸胁苦满,默默不欲饮食,心烦喜呕,或胸中烦而不呕,或渴,或腹中痛,或胁下痞硬,或心下悸,小便不利,或不渴,身有微热,或咳者,小柴胡汤主之。”胸、胁部为肝胆经循行部位,其中嘿嘿、心烦二症与精神疾病有关。小柴胡汤历来被誉为和解少阳、疏肝解郁第一方,许多治疗抑郁的方剂大都由此脱演而来,如钱天来《伤寒溯源集》“夫小柴胡汤,乃升发少阳之要剂也。……小柴胡汤以升发少阳之郁邪,使清阳达表而解散之,即所谓木郁达之之义也。故少阳一经,惟此一方,无他法也。虽有多证,亦不过因此出入变化而已。至变证已离少阳,柴胡不中与之,则更用他法矣。虽后人之补中益气汤及逍遥散之类,其升发清阳开郁解结之义,亦皆不离小柴胡之旨也。”并且96条文中所描叙的症状与《精神病学》中关于抑郁症临床表现的描述“反复或持续出现各种躯体不适感,特别是植物神经系统症状,如:头疼、头晕、心悸、胸闷、气短、四肢发麻、恶心呕吐等”也极为相似。在临床中运用柴胡汤类方治疗抑郁症的临床验案时有报道,可见其治疗抑郁症的效果是可以肯定的。由于经方具有配伍严密,疗效确切之功,所以我们选取小柴胡汤作为和解少阳、调达枢机的主方来治疗抑郁症。
五、小柴胡汤方、药的论述
5.1小柴胡汤方药组成
方药组成:小柴胡汤出自张仲景《伤寒论》由柴胡12g、黄芩9g、半夏9g、人参9g、炙甘草6g、生姜三片、大枣六枚,六味药物组成。(现今多用党参代替人参)
5.2中药疏利肝胆功效述要及现代药理研究
柴胡:为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根或全草。味苦、辛,性微寒。归肝、胆经。功效解表退热、截疟、疏肝解郁、升举阳气。是历代医家推崇的解肝郁、舒肝气之要药。如《药性论》:“能治热气肩背疼痛,宣畅血气。”《主治秘诀》云:“少阳经分药。偏头痛乃少阳也,非柴胡不能除。”《本草蒙筌》:“乃手足少阳、厥阴四经行经药也,泻肝火。止偏头疼,胸胁刺疼及胆瘅疼痛。”《药性解》:“主两胁下痛。疏通肝木,推陈致新。”《滇南本草》“行肝经通结之气,止左胁肝气疼痛。”《医学衷中参西录》“禀少阳生发之气,为足少阳主药,而兼治足厥阴。肝气不舒畅者,此能舒之;胆火甚炽盛者,此能散之。”;现代药理研究表明柴胡有护肝利胆作用,其利胆的主要成分是所含的黄酮类成分。
黄芩:为唇形科植物黄芩的根,味苦,性寒,归肺、胃、大肠、胆经。功效清热燥湿、泻火解毒、止血、安胎。《本草图经》:“仲景治伤寒心下痞满,泻心汤,凡四方皆用黄芩,以其主诸热,利小肠故也。及主妊娠安胎散,亦多用之。”《本草纲目》:“洁古张氏言黄芩泻肺火,治脾湿。”《药鉴》:“见柴胡则寒,为少阳之妙剂。若以猪胆炒之,又能泻肝胆之火也。”《本草备要》:“泻火除湿。心烦喜呕,默默不欲食,又兼脾胃中焦之证,故用黄芩以治手足少阳相火,黄芩亦少阳药也。”《本草分经》:“亦治邪在少阳,往来寒热。”可见黄芩亦主治少阳胆经之症。现代药理黄芩有护肝利胆作用,黄芩提取物对乙醇、四氯化碳、半乳糖胺、过氧化脂质所至的动物肝损害有明显的防治作用,它能使肝糖元含量增加,转氨酶降低;黄芩甙还有解毒作用,黄芩煎剂及乙醇提取物口服或静注,均可促使兔、犬胆汁的排泄,以黄芩素的利胆作用最强。
半夏:为天南星科植物半夏的干燥块茎,味辛,性温,有毒,归脾、胃、肺经。功效燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结。《神农本草经》云:“主伤寒寒热,心下坚,胸胀,咳逆,头眩,咽喉肿痛,肠鸣下气,止汗。”《本草图经》:“胃冷呕哕,方药之最要。”《药类法象》:“治寒痰及形寒饮冷,伤肺而咳。”《本经逢原》:“半夏为足少阳本药,兼入足阳明太阴,虚而有痰气,宜加用之,胃冷呕哕方药之最要。”现代药理研究半夏有镇咳、祛痰作用。制半夏的乙醇提取物有祛痰作用。此外半夏还有镇吐和催吐作用。
党参:为桔梗科植物党参、素花党参或川党参的干燥根。味甘,性平,归脾、肺经。《本草分经》:“补中益气,和脾胃,性味重浊,滞而不灵。”《得配本草》:“入手足太阴经气分。补养中气,调和脾胃。”《本草纲目》:“补中益气,和脾胃,除烦渴。中气微弱,用以调补,甚为平妥。”可见其功效是补中益气、生津养血。现代药理表明党参有抗疲劳、耐寒、耐高温、耐缺氧作用,对辐射损伤有保护作用。亦有一定增强机体免疫系统功能的作用。
甘草:为豆科多年生草本植物甘草、胀果甘草或光果甘草的根和根茎,味甘,性平。归心、脾、胃经。《神农本草经》:“主治五脏六腑寒热邪气,坚筋骨,长肌肉,倍力,金疮肿,解毒。”《药类法象》:“火炙则温,能补上中下三焦元气。调和诸药,共为力而不争。性延,善解诸急,故有国老之称。”《本草思辨录》:“甘草中黄皮赤,确是心脾二经之药,然五脏六腑皆受气于脾,心为一身之宰,甘草味至甘,性至平,故能由心脾以及于他脏他腑无处不到,无邪不祛。”甘草具有很强的抗胃溃疡作用。甘草有突触后抑制作用,对胃肠平滑肌具有解痉作用。甘草对肝脏有明显的保护作用,还有抗脂质氧化作用,因此预防氟烷性肝炎是有益的,甘草不能促进胰腺分泌。甘草有糖皮质激素样作用,并可通过抑制盐皮质激素在肝脏内的代谢谢而间接发挥盐皮质激素样作用。甘草在方药组合、配方、免疫中均具有双向调节作用。
生姜:为姜科多年生草本植物姜的根茎,味辛,性温,归肺、脾、胃经。《开宝本草》:“主伤寒头痛鼻塞,咳逆上气,止呕吐。”《本草纲目》:“生用发散,熟用和中。《药性解》:主通神明,去秽恶,散风寒,止呕吐,除泄泻,散郁结,畅脾胃,疗痰嗽,制半夏,和百药。”《医学启源》谓“制厚朴、半夏毒”;本药有散风寒表邪、解毒及降逆止呕的作用,有“呕家圣药”之称。现代药理研究:生姜有镇静、催眠、抗惊厥作用。生姜有保肝利胆作用。生姜丙醇提取物具有利胆作用。姜酚、姜醇等对四氯化碳所致肝细胞损害呈剂量依赖性抑制作用。生姜还有抗5羟色胺,抑制亚硝酸胺合成、抗肿瘤、抗过敏作用。
大枣:为鼠李科落叶灌木或小乔木植物的成熟果实,味甘,性温,归脾、胃经。《神农本草经》言大枣主治“心腹邪气,安中,养脾气,平胃气,通九窍,助十二经,补少气,少津液,身中不足,大惊四肢重,和百药。久服轻身延年。”《药性赋》:“其用有二:助脉强神,大和脾胃。”《本草备要》:“补脾胃,润心肺,和百药。”《本草求真》:[批]补脾胃中气血。大枣提取物有明显的抗变态反应作用,对IgE抗体产生有特异性抑制作用,并对5羟色胺和组胺有一定的拮抗作用。大枣有镇静、降压、抗惊厥作用。大枣能使动物体重增加,肌力增强。大枣有抗疲劳、促生长及增加四氯化碳中毒的组织血流作用。
5.3中药龙骨、牡蛎的述要
龙骨:本品为古代哺乳动物如象类、犀牛类、三趾马等的骨骼的化石。性甘涩平。归心、肝、肾、大肠经。《吴普本草》谓龙骨,色青白者善。《别录》:“汗出,夜卧自惊,恚怒,……养精神,定魂魄,安五藏。”《本经逢原》:“涩可以去脱,龙骨入肝敛魂,收敛浮越之气。”《医学衷中参西录》:“龙骨,质最粘涩,具有翕收之力,故能收敛元气,镇安精神,固涩滑脱。愚于伤寒、温病,热实脉虚,心中怔忡,精神骚扰者,恒龙骨与萸肉、生石膏并用。龙骨既能入气海以固元气,更能入肝经以防其疏泄元气,且能入肝敛戢肝木……。”《药性论》:“逐邪气,安心神,止冷痢及下脓血,女子崩中带下,止梦泄精,梦交,治尿血,虚而多梦纷纭加而用之。”《本经逢原》:“涩可以去脱,龙骨入肝敛魂,收敛浮起之气。”可见其功效当为:镇惊安神;平肝潜阳;收敛;固涩。龙骨具有镇静催眠作用。龙骨具有抗惊厥作用。龙骨具有促凝血作用。
牡蛎:为长牡蛎、大连湾牡蛎或近江牡蛎的贝壳。性味咸,微寒。归肝、肾经。重镇安神,潜阳补阴,软坚散结,收敛固涩。《神农本草经》:“主治伤寒、寒热,温疟洒洒,惊恚怒气,除拘缓,鼠瘘,女子带下赤白。久服强骨节,杀邪鬼。”《本经崇原》:“惊恚怒气,厥阴肝木受病也。牡蛎南生东向,得水中之生阳,达春生之木气,则惊恚怒气可治矣。具坚刚之质,故久服强骨节。”《海药本草》:“主男子遗精,虚劳乏损,补肾正气,止盗汗,去烦热,治伤阴热疾,能补养,安神,治孩子惊痫。”《医学衷中参西录》:“至于筋原属肝,肝不病而筋之或拘或缓者自愈,故《神农本草经》又谓其除拘缓也。”《本经逢原》:“牡蛎入足少阴,为轻坚之剂。以柴胡引之,去胁下痛。”现代药理研究:牡蛎有增强体液免疫作用。牡蛎有增强消化力作用。牡蛎有滋阴润燥、保肝益肾作用。牡蛎有抗溃疡作用。牡蛎有放射增敏作用,有强化γ射线杀灭癌细胞的作用,增敏率达34.5%～52.6%,但放疗前给药无增敏作用。提取的牡蛎多糖具有降血脂、抗凝血、抗血栓、促进机体免疫机能和抗白细胞下降作用等。
张仲景在《伤寒杂病论》关于应用的龙骨、牡蛎的条文有(118)“火逆下之,因烧针烦躁者,桂枝甘草龙骨牡蛎汤主之。”(112)“伤寒脉浮,医以火迫劫之,亡阳必惊狂,卧起不安者,桂枝去芍药加蜀漆牡蛎龙骨救逆汤主之。”(107)“伤寒八九日,下之,胸满烦惊,小便不利,谵语,一身尽重,不可转侧者,柴胡加龙骨牡蛎汤主之。”《金匮要略•血痹虚劳病脉证并治第六》“男子失精,女子梦交,桂枝加龙骨牡蛎汤主之。”从条文中我们可以看出,龙骨配牡蛎有两大功效,其一为平肝潜阳、镇静安神,其二为收敛固涩的作用。我们在加味小柴胡汤[2123]中取其作用于肝胆经以镇静安神的功效,同时也验证了张仲景龙骨配牡蛎的意义。
5.4加味小柴胡汤[2425]的配伍意义
本方中柴胡气质轻清,升达疏透;黄芩苦寒质重,清泄邪火。二者相伍,外透内泄,柴胡量多而黄芩量少,故偏于透解宣达。半夏、生姜,调理胃气、降逆止呕;人参、甘草、大枣,培土和中、扶助正气。二组药物既可防木邪犯土,亦可扶正以助柴胡、黄芩祛邪。生龙骨、生牡蛎两药伍用加强疏肝、镇肝的同时又能安神定志,对抑郁症的烦躁、失眠可谓有标本兼顾的作用。全方寒温合用,攻补兼施,升降协同,内外并举,可疏利三焦、宣通内外,调达上下、和畅气机。抑郁症的基本病机是邪郁少阳、枢机不利,本方可使气机的郁结得以及早疏通,使全身气、血、津液的生成、输布、运行归于正常,从而阻断抑郁症病机向痰阻、血瘀、郁热、气虚、血虚、津亏、阴虚火旺等方向的发展,防止病情的进一步发展。诸药合用共奏平缓心烦不安、抑郁情绪和伴随的诸多躯体不适之功,以达缓解抑郁不适的目的。
第二部分实验部分研究
一、实验材料和实验方法
1、实验材料
实验动物:健康SD大鼠60只,雌雄各半,体重180一220g,由福建中医学院实验动物中心提供。许可证号SCXK(沪)20110005。
实验药物:小柴胡汤加生龙骨、生牡蛎,中药购于福建中医学院国医堂医院中药房,将生药加水浸泡30分钟后煎煮浓缩至每毫升含生药2g,盐酸氟西汀为礼来苏州制药有限公司产品。
实验仪器:F一4500型荧光分光分度计(日本日立),半自动生化分析仪(BT224)(意大利生物技术公司),放射免疫计数仪(FJ2011PS)(西安核仪器厂),离心机(DDL一5)、手术器械等由福建中医学院实验动物中心提供。
2、动物分组及给药方法
在实验开始前,参考体重和Openfield评分,将6只大鼠随机分成6组:
(1)正常对照组(8只):实验过程中不给予任何刺激,给药过程中按10ml/kg给予0.9%生理盐水,1次/日。
(2)模型组(8只):用孤养加慢性不可预见的中等强度刺激制造大鼠抑郁模型,给药过程中按10ml/kg给予0.9%生理盐水,1次/日。
(3)百忧解组(8只):用孤养加慢性不可预见的中等强度刺激制造大鼠抑郁模型,给药过程中给予0.4mg/ml百忧解混悬液灌胃,1次/日。(相当于1.8mg/Kg体重,为70 Kg成人临床用药等效剂量)。
(4)小柴胡汤加龙骨牡蛎大剂量组(8只):用孤养加慢性不可预见的中等强度刺激制造大鼠抑郁模型,给药过程中给予浓度为4g/ml的剂量灌胃。(相当于生药60g/Kg,为70 Kg成人临床用药2倍剂量)。
(5)小柴胡汤加龙骨牡蛎中剂量组(8只):用孤养加慢性不可预见的中等强度刺激制造大鼠抑郁模型,给药过程中给予浓度为2g/ml的剂量灌胃。(相当于生药30g/Kg,为70 Kg成人临床用药等效剂量)。
(6)小柴胡汤加龙骨牡蛎小剂量组(8只):用孤养加慢性不可预见的中等强度刺激制造大鼠抑郁模型,给药过程中给予浓度为1g/ml的剂量灌胃。(相当于生药15g/Kg,为70 Kg成人临床用药1/2剂量)。
给药方法:采用边造模边给药,每日1次,上午9点开始。
3、模型制备方法
根据文献的方法进行改进。正常组每笼饲养10只,不给予任何刺激。其它五组在实验的32天内,接受各种不同的慢性应激,包括:禁食(24h),禁水(24h),通宵照明,冰水游泳(4℃,5min),电击足底(36v,每隔1min刺激一次,每次持续10s,共20次),夹尾(距尾根1cm处,1min)。每天安排一种,同种刺激不连续出现,使大鼠不能预料将发生的刺激。
注:每种应激的操作方法:
1)冰水游泳:将动物放入盛有4℃水的水桶中(水深15厘米),大鼠的后足尖刚能触及桶底,5分钟后将动物取出放回笼中。
2)夹尾:将大鼠放入固定笼中,露出尾巴,用止血钳夹住距尾根1cm处(用力不要过大,使大鼠发出哀叫声即可)持续一分钟,将大鼠放回饲养笼。
3)电击足底:将大鼠放入电击足底箱内,打开开关,使箱底的金属通电,持续10s,关闭开关一分钟,重复20次,将大鼠放回饲养笼。
4)禁食:24小时断料。
5)禁水:24小时断水。
6)通宵照明:天黑时将日光灯打开,使大鼠在夜间处于光照状态。
4、行为学测定方法
游泳不动时间测定:水桶长、宽各25厘米、高40厘米,将大鼠放入水桶内,大鼠首先挣扎试图逃跑,随后处于一种不动状态,不动状态是指大鼠在水中停止挣扎,处于一种漂浮不动的状态,偶尔以肢体活动以保证头部浮在水面,这种状态被称为“行为绝望”,累计各大鼠5min内的游泳不动时间。于实验的第11天、第22天各测量一次。
5、实验检测指标方法:
①、血中胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白:采用比色法(colorimetry)测定,按试剂盒说明检测
②、白细胞介素1、白细胞介素2、白细胞介素6、肿瘤坏死因子:采用放射免疫分析法(Radio immunoassay,RIA)测定,按试剂盒说明书检测。
③、大脑额叶中5羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素:采用荧光分光光度法(fluorescence spectrophotometry)测定,按试剂盒说明书检测。
6、实验结果处理方法
结果用均数±标准差( ±S)表示,进行单因素方差分析,所有数据并利用SPSS软件包分析。
实验结果
一般状态观察
造模初期[3032]大鼠表现惊恐躁乱,撕咬鸣叫,造模成功后,开始显现“肝郁气滞”的征象,饮食减少,活动减少,常蜷缩少动,毛发逐渐失去光泽,自我清洁次数减少,灌药的抵触性降低。随着喂药的时间延长,西药组、加味小柴胡汤中、大剂量组饮食、体重及活动度增进,逐步回升到造模初期水准,均比模型组有显著差别。
1、实验前后大鼠体重变化:见下表( ±S)
表1 实验前体重比较
组别 例数 剂量 0天 10天 20天 30天
空白组 8 192.0±3.4 200.1±4.1 218.8±2.3 233.8±4.7
模型组 8 188.9±2.5 199.0±5.1 211.6±2.5 222.0±5.9
氟西汀组 8 189.4±5.7 203.1±3.4 215.5±4.6 232.8±3.8
小柴胡汤小组 8 196.8±2.1 202.4±3.5 210.6±4.3 221.0±5.2
小柴胡汤中组 8 196.3±1.7 206.1±3.7 218.6±3.4 233.1±5.7
小柴胡汤大组 8 196.2±3.4 204.2±3.8 217.8±5.2 229.7±4.8
表1实验结果显示:实验前空白组、模型组、氟西汀组与加味小柴胡汤小、中、大剂量组大鼠体重之间均无显著差异(P﹥0.05)。实验后空白组大鼠体重与模型组、氟西汀组均有显著差异(P﹤0.05),空白组与加味小柴胡汤中、大剂量组无显著差异(P﹥0.05),模型组加味小柴胡汤中、大剂量组、氟西汀组均有显著差异(P﹤0.05)。
2、大鼠强迫游泳不动时间:见下表( ±S)
表2大鼠强迫游泳实验不动时间
组别 例数 不动时间s 两两比较(P)
模型组 氟西汀组 小柴胡汤小组 小柴胡汤中组 小柴胡汤大组
空白组 8 124.5±7.6 0.000 0.000 0.000 0.787 0.006
模型组 8 157.3±10.6 0.004 0.246 0.000 0.000
氟西汀组 8 144.7±8.8 0.068 0.000 0.000
小柴胡汤小组 8 152.5±10.1 0.000 0.000
小柴胡汤中组 8 125.6±4.3 0.003
小柴胡汤大组 8 112.6±6.1
表2实验结果显示:空白组与模型组有显著差异(P﹤0.05),模型组与加味小柴胡汤小剂量组无显著差异(P﹥0.05),模型组与西药组、加味小柴胡汤中剂量组、大剂量组有非常显著差异(p<0.01),西药组与加味小柴胡汤小剂量组无显著差异(P﹥0.05),与中、大剂量组(P﹤0.05)有显著差异。
3、血中胆固醇含量比较:见下表( ±S)
表3血中胆固醇含量比较
组别 例数 含量(mmol/L) 两两比较(P)
模型组 氟西汀组 小柴胡汤小组 小柴胡汤中组 小柴胡汤大组
空白组 8 2.3807±0.2369 0.010 0.874 0.466 0.728 0.635
模型组 8 2.9310±0.3541 0.007 0.056 0.004 0.032
氟西汀组 8 2.3482±0.5046 0.376 0.850 0.527
小柴胡汤小组 8 2.5307±0.3937 0.284 0.798
小柴胡汤中组 8 2.0938±0.4862 0.412
小柴胡汤大组 8 2.4783±0.4118
表3实验结果显示:空白组与模型组有显著差异(P﹤0.05),模型组与加味小柴胡汤小剂量组无显著差异(P﹥0.05),模型组与西药组、加味小柴胡汤中剂量组、加味小柴胡汤大剂量组有非常显著差异(p<0.01),西药组与加味小柴胡汤小、中、大剂量组无显著差异(P﹥0.05)。
4、血中高密度脂蛋白含量比较:见下表( ±S)
表4血中高密度脂蛋白含量比较
组别 例数 含量(mmol/L) 两两比较(P)
模型组 氟西汀组 小柴胡汤小组 小柴胡汤中组 小柴胡汤大组
空白组 8 1.4190±0.3294 0.002 0.989 0.040 0.980 0.307
模型组 8 1.0960±0.2566 0.002 0.262 0.002 0.032
氟西汀组 8 1.4170±0.1423 0.041 0.991 0.314
小柴胡汤小组 8 1.2090±0.1678 0.042 0.284
小柴胡汤中组 8 1.4160±0.0712 0.319
小柴胡汤大组 8 1.3160±0.0876
表4实验结果显示:空白组与模型组有显著差异(P﹤0.05),模型组与加味小柴胡汤小剂量组无显著差异(P﹥0.05),模型组与西药组、加味小柴胡汤中剂量组有非常显著差异(p<0.01),模型组与加味小柴胡汤大剂量组有显著差异(P﹤0.05),西药组与加味小柴胡汤中、大剂量组无显著差异(P﹥0.05)。
5、血中甘油三酯含量比较:见下表( ±S)
表5血中甘油三酯含量比较
组别 例数 含量(mmol/L) 两两比较(P)
模型组 氟西汀组 小柴胡汤小组 小柴胡汤中组 小柴胡汤大组
空白组 8 0.5827±0.1518 0.005 0.998 0.347 0.918 0.624
模型组 8 0.7690±0.1017 0.005 0.053 0.017 0.019
氟西汀组 8 0.5829±0.1134 0.348 0.919 0.626
小柴胡汤小组 8 0.6429±0.1194 0.401 0.649
п║╡Я╨ЗлюжпвИ 8 0.5931±0.1941 0.699
п║╡Я╨Злю╢СвИ 8 0.6140±0.1152
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?у╟ввИ 8 6.8463±0.9058 0.017 0.582 0.309 0.661 0.653
дёпмвИ 8 5.4863±0.7710 0.004 0.156 0.006 0.049
╥ЗнВм║вИ 8 7.1513±1.4476 0.120 0.910 0.319
п║╡Я╨Злюп║вИ 8 6.2800±0.7590 0.148 0.566
п║╡Я╨ЗлюжпвИ 8 7.0888±1.4247 0.376
п║╡Я╨Злю╢СвИ 8 6.5975±1.0612
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?у╟ввИ 8 2.5047±0.4902 0.022 0.698 0.118 0.694 0.957
дёпмвИ 8 1.8611±0.5686 0.008 0.436 0.008 0.025
╥ЗнВм║вИ 8 2.6103±0.5411 0.054 0.996 0.658
п║╡Я╨Злюп║вИ 8 2.0736±0.6217 0.053 0.131
п║╡Я╨ЗлюжпвИ 8 2.6117±0.4476 0.655
п║╡Я╨Злю╢СвИ 8 2.4900±0.5553
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?у╟ввИ 8 5.1588±0.7376 0.009 0.879 0.163 0.966 0.708
模型组 8 3.2613±0.5644 0.006 0.187 0.008 0.022
氟西汀组 8 4.2088±0.7779 0.123 0.912 0.599
小柴胡汤小组 8 3.6975±0.5204 0.152 0.303
小柴胡汤中组 8 4.1725±0.7279 0.677
小柴胡汤大组 8 4.0363±0.5159

表8实验结果显示:空白组与模型组有显著差异(p<0.01),模型组与西药组、加味小柴胡汤中剂量组有非常显著差异(p<0.01),模型组与加味小柴胡汤大剂量组有显著差异(P﹤0.05),西药组与加味小柴胡汤小、中、大剂量组无显著差异(P﹥0.05)。
9、血中白细胞介素1含量比较:见下表( ±S)
表9血中白细胞介素1含量比较
组别 例数 含量(mmol/L) 两两比较(P)
模型组 氟西汀组 小柴胡汤小组 小柴胡汤中组 小柴胡汤大组
空白组 8 0.7679±0.1676 0.004 0.869 0.134 0.570 0.453
模型组 8 1.1090±0.3488 0.006 0.136 0.018 0.027
氟西汀组 8 0.7865±0.1434 0.181 0.686 0.557
小柴胡汤小组 8 0.9392±0.2439 0.346 0.446
小柴胡汤中组 8 0.8322±0.1778 0.854
小柴胡汤大组 8 0.8529±0.2012

表9实验结果显示:空白组与模型组有非常显著差异(p<0.01),模型组与西药组、加味小柴胡汤中剂量组有显著差异(P﹤0.05),模型组与加味小柴胡汤大剂量组有非常显著差异(p<0.01),西药组与加味小柴胡汤小、中、大剂量组无显著差异(P﹥0.05)。
10、血中白细胞介素2含量比较:见下表( ±S)
表10血中白细胞介素2含量比较
组别 例数 含量(umol/L) 两两比较(P)
模型组 氟西汀组 小柴胡汤小组 小柴胡汤中组 小柴胡汤大组
空白组 8 6.1521±1.0533 0.003 0.486 0.059 0.525 0.407
模型组 8 7.8455±0.9685 0.017 0.219 0.015 0.024
氟西汀组 8 6.5256±1.1730 0.224 0.952 0.894
小柴胡汤小组 8 7.1825±0.9783 0.202 0.277
小柴胡汤中组 8 6.4934±1.2130 0.846
小柴胡汤大组 8 6.5972±0.9682
表10实验结果显示:空白组与模型组有非常显著差异(p<0.01),模型组与西药组、加味小柴胡汤中剂量组、加味小柴胡汤大剂量组有显著差异(P﹤0.05),西药组与加味小柴胡汤小、中、大剂量组无显著差异(P﹥0.05)。
11、血中白细胞介素6含量比较:见下表( ±S)
表11血中白细胞介素6含量比较
组别 例数 含量(umol/L) 两两比较(P)
模型组 氟西汀组 小柴胡汤小组 小柴胡汤中组 小柴胡汤大组
空白组 8 56.9874±7.4846 0.005 0.746 0.258 0.762 0.878
模型组 8 68.0942±8.4745 0.011 0.073 0.010 0.007
氟西汀组 8 58.1978±7.6289 0.417 0.984 0.864
小柴胡汤小组 8 61.2480±8.7868 0.405 0.327
小柴胡汤中组 8 58.1206±4.7527 0.881
小柴胡汤大组 8 57.5588±6.7978
表11实验结果显示:空白组与模型组有非常显著差异(p<0.01),模型组与西药组、加味小柴胡汤中剂量组有显著差异(P﹤0.05),模型组与加味小柴胡汤大剂量组有非常显著差异(p<0.01),西药组与加味小柴胡汤小、中、大剂量组无显著差异(P﹥0.05)。
12、血中肿瘤坏死因子(TNF—α)含量比较:见下表( ±S)
表12血中肿瘤坏死因子—α含量比较
组别 例数 含量(umol/L) 两两比较(P)
模型组 氟西汀组 小柴胡汤小组 小柴胡汤中组 小柴胡汤大组
空白组 8 5.9461±0.9413 0.004 0.844 0.165 0.645 0.783
模型组 8 7.2895±1.0134 0.007 0.113 0.014 0.009
氟西汀组 8 6.0340±0.8629 0.232 0.792 0.938
小柴胡汤小组 8 6.5716±0.7001 0.348 0.263
小柴胡汤中组 8 6.1516±1.0421 0.852
小柴胡汤大组 8 6.0687±0.6876
表12实验结果显示:空白组与模型组有非常显著差异(p<0.01),模型组与西药组、加味小柴胡汤中、大剂量组有非常显著差异(p<0.01),西药组与加味小柴胡汤小、中、大剂量组无显著差异(P﹥0.05)。
分析与讨论
抑郁症是一个包括了躯体与心理健康的疾病,因此我们需要选择一种能够验证疾病患者躯体和心理的动物模型,现今动物模型不外乎有应激模型、药理学模型、脑损伤模型、转基因动物模型、孤养和分养动物模型等几大类,我们从国内外的文献中筛选出应激抑郁模型(CUMS)为实验的造模模型[2629]。该模型以使应激因子的强度明显降低和快感缺乏的测量作为造模成功的关键。大鼠在接受不同的应激后表现出一系列的情绪和动作异常改变,如行动迟缓、性情暴躁,体重消瘦等,具有成功模拟抑郁的情感活动异常,类似人类抑郁症患者表现出的神经系统症状,如焦虑、沉默、压抑、淡漠等。
1、抑郁造模对大鼠体重、精神变化的影响
抑郁症模型大鼠模拟出了类似抑郁症患者的躯体不适以及精神压抑两种症状,如食欲降低,体重下降(增长缓慢),运动能力明显迟钝,沉默寡欢等。本实验前各组大鼠体重之间均无显著差异(P﹥0.05),实验后空白组大鼠体重与氟西汀组、加味小柴胡汤中、大剂量组无显著差异(P﹥0.05),空白组与加味小柴胡汤小剂量组有显著差异(P﹤0.05),模型组与氟西汀组、加味小柴胡汤中、大剂量组均有显著差异(P﹤0.05),模型组与加味小柴胡汤小剂量组无显著差异(P﹥0.05)。通过加味小柴胡汤的功效分析,舒肝理气能调节情致活动,又能够达到调理和治疗肝郁气滞壅塞脾胃,引起的中焦脾胃症状,能开胃进食,增加体重。结合实验研究说明了加味小柴胡汤具有抗抑郁和增加体重的双重功效。
2、大脑额叶中去甲肾上腺素、多巴胺、5—羟色胺含量变化对抑郁症的影响
大脑的前额叶与丘脑背内侧核共同构成觉察系统,是精神活动的最主要场所。额叶的功能是交换产出样本,通过联结路径点亮丘觉产出意识,参与调节人的情绪、食欲、睡眠、体温、疼痛、呕吐、昼夜调节和内分泌等功能功能,因此额叶—边缘系统的损害可能正是抑郁症临床症状产生的神经生物学基础[33]。
氟西汀药物属于选择性5HT重摄取抑制剂,为第四代抗抑郁药,适用于各种类型的抑郁症。本实验去甲肾上腺素、多巴胺和5—羟色胺三种递质的模型组与西药氟西汀组比较都有非常显著差异(p<0.01)。也进一步证实和支持了抑郁症中枢单胺类神经递质发病的假说。
该实验结果显示加味小柴胡汤能有效提高或降低大鼠脑内的NE、5HT、DA含量,加味小柴胡汤中剂量组与模型组比较有非常显著差异(p<0.01),加味小柴胡汤大剂量组与模型组比较有统计意义(P﹤0.05),提示加味小柴胡汤通过舒畅肝胆气机来调治抑郁在中枢神经学机制中起到了作用,整体性的能提高或调节脑内的神经递质,有较好的抗抑郁或预防抑郁的作用,也符合和验证了西医的下丘脑一垂体一肾上腺轴机制学说[34]。
3、血中胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白含量变化对抑郁症的影响
血脂紊乱是抑郁症的一常见实验指标,临床抑郁症患者大部分具有高脂血症,国内外研究表明抑郁症患者血清中胆固醇、甘油三酯升高与疾病的严重程度成正相关,而高密度脂蛋白则呈负相关关系,本实验观察空白组与氟西汀组、加味小柴胡汤小剂量组、中剂量组、大剂量组无显著差异(P﹥0.05),提示抑郁患者确实存在脂质代谢谢方面的异常,模型组在胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)含量方面与氟西汀组、加味小柴胡汤中剂量组均有非常显著差异(P﹤0.01);与加味小柴胡汤大剂量组有统计学意义(P﹤0.05)。实验的指标结果表明加味小柴胡汤可以预防或治疗慢性应激引起的血脂紊乱。对于高脂血症的血脂异常,中医多以痰浊论述,以化痰之法治疗,加味小柴胡汤疏泻肝胆气机,协助脾胃运化功能,从而达到间接的预防脾虚生痰发生,此外方中有半夏、牡蛎等化痰之品,进一步增强了化痰的功效,故能调节血脂异常。
4、细胞因子免疫指标的变化对抑郁症的影响
细胞因子是造血系统、免疫系统在炎症反应中活化细胞产生的,能调节细胞分化增殖和诱导细胞发挥功能,是中枢神经系统和内分泌系统之间信息交流的重要因子。国内外文献报道抑郁症大多伴随免疫系统的改变。本实验研究发现抑郁大鼠模型血清中IL1、IL2、IL6和TNFα含量较正常组有明显升高,与正常对照组比较有非常显著性差异(P﹤0.01),提示有多种细胞因子的过度分泌,有免疫激活。模型组与西药氟西汀组对比有显著意义(P﹤0.05),说明能抑制细胞炎性因子的分泌。模型组与加味小柴胡汤小剂量组无显著差异(P>0.05),与加味小柴胡汤中、大剂量组有统计学意义(P﹤0.05)。血清中IL1、IL2、IL6和TNFα含量的变化提示细胞因子在抑郁中起到一定的作用,而结果的变化也提示说明加味小柴胡汤具有促进机体免疫的能力。加味小柴胡汤能促进机体免疫,从中医角度分析当为加味小柴胡汤疏泄肝胆气机,促进脾主运化以及主统血的功能,脾气旺而能运化水谷精微和更好的生血则机体的免疫能力随之提高。
全文小结
1、本论文通过搜集大量文献资料,归纳整理出中医对抑郁症的认识,并对抑郁症的现代研究治疗概况作一概括总结。
2、以加味小柴胡汤为实验方,以邪郁少阳、枢机不利为最基本病机特点,提出和解少阳、调达枢机为治疗大法,并复制了抑郁症大鼠动物模型,设立空白、模型、西药、中药小、中、大六组对其体重及部分生化指标进行比较。理论结合实验来验证其治疗疗效。
3、实验结果显示:加味小柴胡汤能使抑郁动物模型恢复至空白组大鼠的体重水平,从而起到比氟西汀更能增加体重的抗抑郁作用;通过西医发病机制的单胺类神经递质失衡说以及脂质代谢谢异常说等等三种学说入手,验证治疗疗效,证实加味小柴胡汤是治疗抑郁症的有效方剂,且治疗效果更优于西药氟西汀。
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