哈蟆油的真伪鉴别

作者:刘娟,刘爽,刘程诚

哈蟆油为蛙科动物中国林蛙Rana temporaria chensinensis David雌蛙的干燥输卵管,始载于《神农本草经》,具有补肾益精,养阴润肺的功效。用于阴虚体弱,神疲乏力,心悸失眠,盗汗不止,痨嗽咳血[1]。随着哈蟆油的食用与药用价值越来越被人们重视,市场需求量也日益增大,人们加大了对野生林蛙的捕捉,由于捕捉过度、农药污染等因素,影响中国林蛙的繁殖与生境,资源大幅减少。哈蟆油供不应求,价格昂贵,市场上出现了一些伪品及代用品,因此对哈蟆油的真伪鉴别尤为重要。

1 材料、仪器和试剂

哈蟆油购买于黑龙江林蛙生态科技有限公司,青蛙、蟾蜍捕捉于佳木斯市四丰山水库,青蛙油、蟾蜍油均为自制,经佳木斯大学化学与药学院刘娟教授鉴定为正品,Olympus光学显微镜,雌二醇(中国药品生物制品检定所,批号:100182-200103)。

2 方法与结果

2.1 性状鉴别

哈蟆油、青蛙油、蟾蜍油分别为中国林蛙、青蛙和中华大蟾蜍雌蛙的输卵管,本实验采用湿法取油,阴干,其性状见表1。

表1三种蛙油的性状鉴别(略)

2.2 显微鉴别

分别取干燥至恒重的哈蟆油、青蛙油和蟾蜍油适量,研成粉末,取适量粉末于载玻片上,滴加1～2滴蒸馏水,盖上盖玻片,加碘酊染色,置Olympus光学显微镜下观察,用目微尺测量其细胞直径范围。

哈蟆油,如图1所示,镜下观察为黄色或金黄色,腺体细胞长方形,直径25～75μm,壁较明显,细胞核椭圆形,明显,位于细胞中间或略偏向细胞内腔一侧。其横断面呈管状,具空腔,细胞三角形或梯形,细胞壁明显,排列紧密。青蛙油,腺体细胞多为五边形,排列整齐。腺体内腔较宽,直径为37～86μm,整个腺体布满细小纹理,细胞壁明显,腺体细胞核明显。横断面细胞类长方形,排列整齐,紧密。如图2所示。蟾蜍油,腺体细胞形态不一,排列不整齐,细胞较小,直径为20～52μm,细胞壁不明显,腺体上的细小纹理少, 腺体细胞核不明显。横断面呈类圆形,空腔较大,细胞长圆形,排列疏松,如图3。

图1 哈蟆油粉末特征图(10×40)(略)

图2 青蛙油粉末特征图(10×40)(略)

图3 蟾蜍油粉末特征图(10×40)(略)

2.3 薄层色谱鉴别[2]

分别称取哈蟆油、青蛙油和蟾蜍油2 g,于乳钵中研成小碎块,置索氏提取器中,用丙酮100mL提取6h,提取液浓缩,作为供试液。取供试液,点于硅胶GF254板上,以石油醚∶乙酸乙酯(4∶1)为展开剂,展开,取出,晾干。喷36%乙酸∶浓硫酸(1∶1)显色,置105℃烘箱中5min,在自然光及紫外光下观察。如图4所示,三种蛙油中均含有雌二醇、胆固醇和维生素A。

图4 三种蛙油的薄层色谱鉴别(略)

a 哈蟆油 b 青蛙油 c 蟾蜍油 d 胆固醇 e 雌二醇 f 维生素A

2.4 膨胀度实验

分别将三种蛙油破碎成直径约3mm碎块,于80℃干燥4h,称取0.2g,依据《中国药典》2005年版一部膨胀度测定法测定,开始6h内每1小时振摇一次,然后静置18h,倾去水液,重复3次,读取样品膨胀后的体积,计算,哈蟆油的膨胀度为57,符合《中国药典》规定的55,青蛙油的膨胀度为45,蟾蜍油的膨胀度为32。

3 讨论

通过对三种蛙油的性状、显微、薄层色谱和膨胀度进行实验,能够准确的鉴别出哈蟆油、青蛙油和蟾蜍油,此方法简单易行,研究结果可为鉴别哈蟆油提供可靠的理论基础和科学依据。